1934年7月，中共中央指示鄂豫皖省委组织战略转移，创建新苏区。因中央红军红七军团已率先北上，红二十五军对外采用“第二先遣队”番号。

1934年11月16日，红二十五军在河南省罗山县何家冲举行誓师大会，正式以“中国工农红军北上抗日第二先遣队”名义出征，隶属中共鄂豫皖省委直接指挥。撤销师级建制，军直辖第223团、224团、225团及手枪团，总兵力2980人，配备步枪1500余支，轻重机枪40余挺。军长程子华，政委吴焕先，副军长徐海东，政治部主任戴季英。

1934年11月—12月，突破封锁与庾家河血战。11月26日，在河南方城独树镇遭国民党军116师突袭，经白刃格斗击退敌军，伤亡300余人，史称“独树镇战斗”。12月10日，在陕西雒南庾家河（今丹凤县）召开省委会议时，遭国民党军60师突袭。经20余次反复冲杀，毙伤敌300余人，军长程子华、副军长徐海东重伤，红224团撤销建制。

1935年1月9日，攻克陕西镇安县城，建立首个县级苏维埃政权。2月1日，在蔡玉窑击溃陕军126旅，歼敌一个多营，缴获步枪200余支。2月5日，在蓝田县文公岭设伏，歼灭陕军126旅两个多营，毙敌旅长以下500余人。4月9日，在蓝田九间房全歼陕军警3旅，缴获轻重机枪40余挺，彻底粉碎国民党军第一次“围剿”。

1935年5月—7月，参加第二次反“围剿”与战略抉择。6月16日，奇袭湖北郧西荆紫关，缴获物资无数，切断国民党军补给线。7月2日，在山阳县袁家沟口设伏，全歼陕军警备1旅，毙伤俘敌1700余人，缴获迫击炮6门、步枪1000余支。7月15日，获悉中央红军北上，主动放弃鄂豫陕根据地，西进甘肃策应。

1935年8月21日，在甘肃泾川四坡村与国民党军激战时，政委吴焕先牺牲，部队歼敌一个团。9月15日，抵达陕西延川县永坪镇，与陕北红军会师，会师时兵力增至3400人。

1935 年 9 月 18 日，红二十五军与陕北红军（红二十六、红二十七军）在陕西延川永坪镇正式合编为红十五军团，番号正式取消。10 月，中央红军（红一方面军）到达陕北后，红十五军团于 11 月 3 日正式编入红一方面军序列。

红二十五军改编为红十五军团第 75 师，红二十六军改编为第 78 师，红二十七军改编为第 81 师，全军团共 7000 余人，徐海东任军团长，程子华任政委，刘志丹任副军团长兼参谋长。

红二十五军主力北上后，留在鄂豫陕根据地的部队于 1935 年 10 月 6 日组建红七十四师，师长陈先瑞，政委李隆贵，全师约 700 人。该师在极端困难条件下坚持游击战争，至 1936 年 12 月发展到 2100 余人。1937 年 8 月，红七十四师在陕西三原改编为八路军第一一五师留守处，后改称西北留守兵团警备第四团，承担保卫陕甘宁边区的任务。

历任军长：

程子华（1934.11.16—1935.9.18）

徐海东（1935.8.21—1935.9.18，代理军长）

历任政委：

吴焕先（1934.11.16—1935.8.21）

程子华（1935.8.21—1935.9.18，兼任政委）

历任副军长：

徐海东（1934.11.16—1935.9.18）

历任政治部主任：

戴季英（1934.11.16—1935.9.18）

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